Пероксидаза

Методика определения пероксидазы в лейкоцитах

Пероксидаза может выявляться нами по методу Сато. Фиксированные в спирт-формалине (1 минуту) мазки после отмывания водой на 30 секунд помещались в 0,5%-ный раствор сернокислой меди (CuS04 ) , а затем — на 1 минуту в заранее приготовленный раствор бензидина (дистиллированная вода — 200 мл; бензидина — 0,2; 2%-ный раствор перекиси водорода — 0.02).

При выявлении оксидазы фиксированные в спирт-формалине мазки окрашивались по методу, описанному в руководстве Г. И. Роскина. Основной красящий раствор готовится ex tempore соединением равного количества 1%-ного раствора диметилфенилендиамина (или же диэтилфенилендиамина) и 1%-ного раствора -нафтола. Поскольку а-нафтол очень плохо растворяется в дистиллированной воде, то его растворение лучше производить в кипящей воде с добавлением по каплям 10%-ного раствора КОН для полного растворения.

[gard]

Наличие пероксидазы и оксидазы устанавливается по появлению в цитоплазме синих гранул. Распределение нейтрофилов на три группы также производилось по интенсивности их окрашивания.

При изучении пероксидазы нейтрофилов с помощью гистохимических методов мы обнаруживали значительные количества ее уже в промиелоцитах. Иногда единичные зерна пероксидазы определялись в миелобластах. По мере созревания гранулоцитов количество пероксидазы в них несколько уменьшается. Однако все зрелые нейтрофилы содержат пероксидазу. Наличие большого количества пероксидазы в миелоцитах и промиелоцитах делает возможным предположение об участии пероксидазы в синтезе веществ, необходимых для роста и созревания нейтрофилов. Количество пероксидазы при воспалении существенно не изменяется. У больных с тяжелыми формами хронического миелоза активность пероксидазы, как правило, значительно повышена. В начальных стадиях заболевания нейтрофильные элементы содержат нормальное количество пероксидазы. Некоторое уменьшение пероксидазы отмечено нами у больных, получающих стероидную терапию.

Пероксидаза

Оксидаза впервые появляется в миелоцитах и нарастает в более зрелых элементах. Применение АКТГ сопровождается значительным уменьшением количества оксидазы в нейтрофилах.

Для изучения ферментативной активности лейкоцитов особенно широкое применение в настоящее время получило определение активности щелочной и кислой фосфатаз в нейтрофилах периферической крови.

[box type=»bio»] Щелочная фосфатаза впервые была обнаружена в зрелых нейтрофилах периферической крови [/box]

Щелочная фосфатаза впервые была обнаружена в зрелых нейтрофилах периферической крови Гомори (Gomori) в 1939 г., а затем и рядом других авторов. Содержание фосфатазы в зрелых миелоидных элементах костного мозга больше, чем в зрелых нейтрофилах периферической крови. Содержание фосфатазы в нейтрофилах почти в 1000 раз больше, чем в плазме крови.

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *